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玻璃層析柱裝柱的技巧和使用注意事項

發布時間:2022-11-17      點擊次數:159
   玻璃層析柱適用于分子篩、離子交換、凝膠滲透與親和層析。隨著液相層析法進入血液制品生產,利用層析法,可純化血漿中多種蛋白,例如白蛋白等等。越來越多生產單位相繼使用,效果甚佳,甚為滿意。
 
  玻璃層析柱裝柱的技巧:
  柱層析的裝柱非常重要,裝柱的效果會直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。濕法裝柱很簡單,使用也較普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊,然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。
 
  用漏斗將活好的固定相倒入柱子中,打開底部活塞,將柱子中高出固定相的溶劑放出。期間不斷用橡皮棒敲打,將固定相敲實,做到密實均勻無氣泡即可。
 
  很多時候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子,而且在柱子中沒有氣泡產生。
 
  干法裝柱與濕法裝柱剛好相反的是,它是將干燥的吸附劑從柱子上端直接加入到一個空的柱子中,然后用油泵抽柱子底部,相當于減壓過柱,直到柱子變得很結實,再用淋洗劑“走柱子”。
 
  干法裝柱的一個缺點就是在裝入洗脫劑后,由于溶劑和固定相之間的吸附放熱,所以柱子容易變花,影響分離效果。
 
  玻璃層析柱使用注意事項:
  1、除氯化的碳氫化合物。丙酮、酮類化合物、脂肪族脂和苯酚之外,其他的所有有機溶劑均可適用。
 
  2、禁止使用氫氧化鈉,鹽酸或醋酸溶液,因上述溶液會損壞尼龍網篩。
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